Диахим набор для клинического анализа мочи. Набор реагентов для клинического анализа мочи



Скачать 118.64 Kb.
Дата27.10.2016
Размер118.64 Kb.

ДИАХИМ - Набор для клинического анализа мочи.

Набор реагентов для клинического анализа мочи.

Инструкция по применению

Набор реагентов для клинического анализа мочи предназначен для определения рН, обнаружения глюкозы, кетонов, билирубина, уробилиноидов, качественного и количественного определения содержания белка в моче в клинико-диагностических лабораториях.

Набор рассчитан на 1000 проб для определения рН и качественного определения белка, глюкозы, уробилиноидов, кетонов; 400 проб – для качественного определения билирубина и 330 проб – для количественного определения белка при расходе 3 мл 3% раствора сульфосалициловой кислоты на один анализ.

Принцип реакции:


    Определение рН.

    рН мочи определяется по изменению цвета индикатора бромтимолового синего . Границы изменения окраски индикатора лежат в диапазоне значений рН 5,0 – 9,0.



    Определение белка.

Белок под действием сульфосалициловой кислоты коагулирует, что приводит к помутнению мочи. Интенсивность помутнения пропорциональна содержанию белка в моче и определяется фотометрически при длине волны 600 (590-650) нм.


Определение глюкозы, проба Гайнеса

Глюкоза при нагревании в щелочной среде восстанавливает гидрат окиси меди (синего цвета) в гидрат закиси меди (зеленого, желтого, оранжевого или коричневого цвета).

Определение билирубина

Билирубин, после его осаждения хлоридом бария, под действием треххлористого железа (реактив Фуше) превращается в зеленый биливердин. Интенсивность окраски пропорциональна содержанию билирубина.


Определение уробилиноидов

Уробилиноген при реакции с п-диметиламинобензальдегидом (реактив Эрлиха) образует соединение, окрашенное в красный цвет. Интенсивность окраски пропорциональна содержанию уробилиноидов.



Определение кетонов

Кетоны в щелочной среде взаимодействуют с нитропруссидом натрия (реактив Лестраде) с образованием соединений красно-фиолетового цвета. Интенсивность окраски пропорциональна содержанию кетонов в моче.



Состав набора:

  • Бромтимоловый синий, спиртовой раствор – 1 флакон (20 мл).

  • Кислота сульфосалициловая, 60 % раствор – 1 флакон (100 мл).

  • Калибратор – калибровочный раствор альбумина, 1,0 г/л – 1 флакон (10 мл).

  • Реактив Гайнеса, концентрированный раствор – 1 флакон (100 мл).

  • Реактив Фуше – 1 флакон (50 мл).

  • Барий хлористый – 2 флакона (по 150 г).

  • Реактив Эрлиха – 1 флакон (100 мл).

  • Реактив Лестраде – 1 флакон (20 г).

Анализируемые пробы

Свежая моча.


Меры предосторожности при работе с набором


Потенциальный риск применения набора – класс 2а.

В состав набора входят сульфосалициловая, трихлоруксусная, соляная кислоты, натрия гидроокись, медь сернокислая, п-диметиламинобензальдегид, барий хлористый, натрий нитропруссидный. При работе с ними следует соблюдать осторожность и не допускать попадания на кожу и слизистые; при попадании немедленно промыть пораженное место большим количеством проточной воды. При проглатывании следует выпить 0,5 л теплой воды и вызвать рвоту.

Меры предосторожности – соблюдение "Правил устройства, техники безопасности, производственной санитарии, противоэпидемического режима и личной гигиены при работе в лабораториях (отделениях, отделах) санитарно-эпидемиологических учреждений системы Министерства здравоохранения СССР" (Москва, 1981 г.).

При работе с набором следует надевать одноразовые резиновые или пластиковые перчатки.


Оборудование, материалы и реагенты:


  • Спектрофотометр СФ-2000-02, спектральный диапазон от 200 до 750 нм;

  • колбы конические вместимостью 100 мл, 200 мл;

  • цилиндры мерные вместимостью 50 мл, 100 мл;

  • флакон из темного стекла вместимостью 200 мл;

  • колбы мерные вместимостью 200 мл, 1 л;

  • весы лабораторные второго класса точности типа ВЛР-200 г;

  • пипетки, позволяющие отбирать объемы жидкости 1,0; 2,0; 3,0;4,0 и 5,0 мл;

  • пробирки стеклянные вместимостью 10 мл;

  • бумага фильтровальная лабораторная;

  • секундомер механический;

  • чашки Петри;

  • баня водяная;

  • раствор натрия хлористого 9 г/л;

  • вода дистиллированная;

  • перчатки резиновые или пластиковые.

Подготовка реагентов для анализа

Приготовление рабочего раствора бромтимолового синего


Бромтимоловый синий спиртовой раствор разбавить водой дистиллированной в соотношении 1:4.

Рабочий раствор бромтимолового синего можно хранить при комнатной температуре (18-25) оС в защищенном от света месте в плотно закрытом флаконе не более 6 мес.



Приготовление 20 % раствора сульфосалициловой кислоты

В колбу коническую вместимостью 200 мл внести 50 мл 60 % раствора сульфосалициловой кислоты, добавить 100 мл дистиллированной воды и тщательно перемешать, перенести во флакон из темного стекла.

Раствор сульфосалициловой кислоты 20 % можно хранить при комнатной температуре в плотно закрытом флаконе в течение срока годности набора.

Приготовление 3 % раствора сульфосалициловой кислоты

В мерную колбу вместимостью 1 л внести 50 мл 60 % раствора сульфосалициловой кислоты, довести раствор до метки дистиллированной водой.

Раствор сульфосалициловой кислоты 3 % можно хранить при комнатной температуре в плотно закрытом флаконе в течение срока годности набора.

Калибровочный раствор альбумина 1,0 г/л

Готов к применению.

После вскрытия флакона раствор можно хранить при температуре (2-8) оС не более 6 мес.

Приготовление рабочего раствора реактива Гайнеса

Реактив Гайнеса концентрированный разбавить водой дистиллированной в соотношении 1:4.

Рабочий раствор реактива Гайнеса можно хранить при комнатной температуре в защищенном от света месте в течение срока годности набора.

Реактив Фуше

Готов к применению. Перед применением взболтать.

После вскрытия флакона раствор можно хранить при комнатной температуре в плотно закрытом флаконе в течение срока годности набора.

Приготовление раствора бария хлористого 15 %

150 г бария хлористого внести в мерную колбу вместимостью 1 л, добавить 800 мл дистиллированной воды, тщательно перемешать до полного растворения, довести дистиллированной водой до метки и вновь тщательно перемешать.

Раствор бария хлористого можно хранить при комнатной температуре в течение срока годности набора.

Реактив Эрлиха


Готов к применению.

После вскрытия флакона раствор можно хранить при комнатной температуре в плотно закрытом флаконе в течение срока годности набора.


Реактив Лестраде


Готов к применению.

После вскрытия флакона реактив можно хранить при комнатной температуре в плотно закрытом флаконе в течение срока годности набора.


Проведение анализа
1. Определение рН

К 1-2 мл свежесобранной мочи добавить 1-2 капли рабочего раствора бромтимолового синего.



  • желтый цвет соответствует кислой реакции;

  • бурый цвет соответствует слабокислой реакции;

  • травянистый цвет соответствует нейтральной реакции;

  • буровато-зеленый цвет соответствует слабо щелочной реакции;

  • зеленый и синий цвет соответствует щелочной реакции.

2. Определение содержания белка

Качественное определение

В две пробирки, опытная и контрольная (холостая проба), вместимостью 10 мл, внести по 1,0-2,0 мл профильтрованной или центрифугированной мочи. В опытную пробирку добавить 2-3 капли 20 % раствора сульфосалициловой кислоты. На темном фоне сравнить прозрачность опытной и контрольной (холостой) проб. Помутнение в пробирке с опытной пробой указывает на наличие белка в пробе мочи.



Примечание.

Избыток 20 % раствора сульфосалициловой кислоты приводит к растворению белка.



Количественное определение

Компоненты и анализируемые пробы отмерить в количествах, указанных в таблице 1.

Таблица 1

Отмерить, мл

Опытная проба

Контрольная
(холостая) проба

Образец, профильтрованная моча

1,0

1,0

Раствор сульфосалициловой кислоты 3 %

3,0

-

Раствор натрия хлористого, 9 г/л

-

3,0

Содержимое пробирок тщательно перемешать, выдержать при комнатной температуре (18-25) оС в течение 10 мин. Измерить оптическую плотность опытной пробы при длине волны 600 (590-650) нм, против контрольной (холостой) пробы в кювете с длиной оптического пути 1,0 см.

Примечание.

При стоянии образцов более 20 мин возможно уменьшение значений оптической плотности за счет оседания части преципитата. Непосредственно перед измерением пробирку с опытной пробой тщательно встряхнуть.

Расчет произвести по калибровочному графику.

Построение калибровочного графика

Для построения калибровочного графика в 5 пробирок внести калибровочный раствор альбумина и раствор натрия хлористого 9 г/л в с в соответствии с таблицей 2.

Таблица 2

пробирок


Калибровочный раствор

альбумина, мл



Раствор натрия

хлористого 9 г/л, мл



Концентрация белка,

г/л


1

0,25

4,75

0,05

2

0,5

4,5

0,10

3

1,0

4,0

0,20

4

2,5

2,5

0,50

5

5,0

-

1,00

Полученные разведения обработать так же, как и образец.

Примечания.

Линейная зависимость сохраняется до концентрации белка 1 г/л. При более высоких концентрациях пробу развести в 2-3 раза, результат умножить на разведение.

Результаты, получаемые данным методом чувствительны к изменениям температуры. Рекомендуется производить измерения при комнатной температуре. Ложноположительные результаты могут быть получены при наличии в моче контрастных веществ, содержащих органический йод, поэтому тест нельзя использовать у лиц, принимающих препараты йода.

Ложноположительный тест может быть также обусловлен приемом сульфаниламидных препаратов, больших доз пенициллина и при высоких концентрациях в моче мочевой кислоты.



3. Определение глюкозы

В пробирку вместимостью 10 мл внести 3-4 мл мочи, добавить 5-10 капель реактива Гайнеса, перемешать или выдержать на кипящей водяной бане в течение 5 мин. В присутствии глюкозы появляется зеленая, желтая, оранжевая или коричневая окраска жидкости и осадок. Синий цвет указывает на отсутствие глюкозы в моче.



Примечание. Моча больных диабетом должна исследоваться в первую очередь, т.к. ферменты бактерий и дрожжевых грибов частично или полностью разлагают глюкозу. То же самое наблюдается при бактериурии.

Нижний предел обнаружения глюкозы в моче составляет 0,5 ммоль/л.



4. Определение билирубина

В пробирку вместимостью 20 мл внести 10 мл мочи и 5 мл раствора бария хлористого 15%, тщательно перемешать и профильтровать через фильтр. Барий хлористый осаждает билирубин.

Фильтр поместить в чашку Петри и на него нанести 2 капли реактива Фуше. Появление сине-зеленого, голубовато-изумрудного пятна свидетельствует о присутствии билирубина в моче.

Примечание. Если реакция мочи щелочная, то необходимо подкислить ее несколькими каплями 30 % уксусной кислоты.

5. Определение уробилиноидов

В пробирку вместимостью 10 мл внести 1–2 мл свежевыпущенной мочи, охлажденной до комнатной температуры, добавить 1-2 капли реактива Эрлиха из расчета 1 капля реактива Эрлиха на 1 мл мочи, тщательно перемешать круговыми движениями и включить секундомер.

Окрашивание мочи в красный цвет в течение первых 30 сек, после добавления реактива Эрлиха, указывает на повышенное содержание уробилиногенов. Отсутствие окраски или ее появление через 60 сек, после добавления реактива Эрлиха указывает, что концентрация уробилиногенов в моче в норме.

Примечание. Определению уробилиноидов может мешать билирубин, при обнаружении билирубина его следует предварительно удалить, осадив раствором хлористого бария 15% (см п. определение билирубина).

Нижний предел определения уробилиноидов составляет 3,0 ммоль/л.



6. Определение кетонов

Нанести небольшое количество (на кончике ножа) реактива Лестраде на фильтровальную бумагу, добавить 2-3 капли анализируемой мочи и включить секундомер. Появление розоватого, сиреневого или темно-фиолетового окрашивания через 2 мин указывает на наличие в моче кетонов.

Нижний предел обнаружения кетонов составляет 0,5 ммоль/л.

Условия хранения и эксплуатации набора


Набор должен храниться в упаковке предприятия-изготовителя при температуре (2-8) оС течение всего срока годности.

Срок годности набора – 1 год.

Компоненты набора после вскрытия флаконов можно хранить при комнатной температуре(18-25) оС в плотно закрытых флаконах в течение срока годности набора.

Рабочий раствор бромтимолового синего можно хранить при комнатной температуре в защищенном от света месте в плотно закрытом флаконе не более 6 мес.

Раствор сульфосалициловой кислоты 20 % можно хранить при комнатной температуре в плотно закрытом флаконе в течение срока годности набора.

Раствор сульфосалициловой кислоты 3 % можно хранить при комнатной температуре в плотно закрытом флаконе в течение срока годности набора.

Калибровочный раствор альбумина 1,0 г/л после вскрытия флакона можно хранить при температуре (2-8) оС не более 6 мес.

Рабочий раствор реактива Гайнеса можно хранить при комнатной температуре в защищенном от света месте не более 6 мес.

Реактив Фуше после вскрытия флакона можно хранить при комнатной температуре в плотно закрытом флаконе в течение срока годности набора.

Раствор бария хлористого 15 % можно хранить при комнатной температуре в течение срока годности набора.

Реактив Эрлиха, после вскрытия флакона можно хранить при комнатной температуре в плотно закрытом флаконе в течение срока годности набора.

Реактив Лестраде после вскрытия флакона можно хранить при комнатной температуре в плотно закрытом флаконе в течение срока годности набора.

Для получения надежных результатов необходимо строгое соблюдение инструкции по применению набора.
Меры предосторожности.

Меры предосторожности – соблюдение «Правил устройства, техники безопасности, производственной санитарии, противоэпидемического режима и личной гигиены при работе в лабораториях (отделениях, отделах ) санитарно- эпидемиологических учреждений системы Министерства здравоохранения СССР», Москва, 1981г.

При работе следует одевать одноразовые резиновые или пластиковые перчатки, так как исследуемые образцы следует рассматривать как потенциально инфицированные, способные длительное время сохранять и передавать возбудители вирусной инфекции.

Условия хранения и эксплуатации.

Хранение реагентов при tº 2-25º С в темном месте.



Для получения надежных результатов необходимо строгое соблюдение инструкции по применению набора.
По всем вопросам, возникшим в результате использования набора, просим обращаться к нашим представителям или непосредственно в фирму по тел. (812) 458-44-50
НПФ "АБРИС+"

Россия, Санкт-Петербург, 196084, ул.Цветочная, д.16 БЦ «Осипофф», оф. 207
тел: 8-800-1000-422


База данных защищена авторским правом ©bezogr.ru 2016
обратиться к администрации

    Главная страница